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上海闪晶分子生物科技有限公司

企业地址: 新桥民强路289号 企业邮编: 201612
联系电话: 13761630405 所属行业: 学术/科研
公司传真: 公司所在地: 上海 松江
公司网站: 企业类型: 私营/民营
电子邮件: 5335126092@qq.com 联系人: 陈先生
企业全称: 上海闪晶分子生物科技有限公司 QQ:
企业简介: 上海闪晶生物科技有限公司2004年成立于上海,是一家长期致力生物医药研发外包服务的公司.

蛋白表达与纯化技术服务

商机面向地区: 上海 松江 发布日期: 2023年5月26日
供求信息分类: 化工 实验室用品 更新日期: 2023年7月5日
销售信息: 供应 蛋白表达与纯化技术服务    
供求信息描述:

步骤1. 目标基因全基因合成:

从基因库中搜索目标蛋白的cDNA序列。如果我们的cDNA文库中有这个基因,我们免费提供给客户。
根据选用的表达系统对cDNA进行密码子优化,密码子优化。
合成设计好的基因序列。
提供给客户:目标基因(在T载体或常规穿梭载体上)及测序报告。
价格:3.80元/碱基,如果客户直接提供构建好的质粒,则免去这部分费用.
时间:2~3周,根据基因的大小而定.详见全基因合成服务
步骤2. 目标基因亚克隆:

扩增并抽提含有目标基因的载体质粒。
将目标基因亚克隆到合适的表达质粒上。
测序验证构建质粒的准确性。
闪晶生物免费提供如下表达载体:
提供给客户:正确构建的重组表达质粒,含重组质粒的DH5α菌株及测序报告。
价格:免费 
时间:1-2周
步骤3. E. coli表达菌株转化及筛选:

扩增并抽提构建好的表达质粒。
将表达质粒转化到高效的E.Coli表达菌株中。
至少挑选5个阳性克隆于LB培养基中扩增并诱导表达目标蛋白。
SDS-PAGE电泳检测培养后中目标蛋白的表达情况,并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。
可提供表达菌株:DH5α, Top10, JM115, BL21 (DE3), BL21 (DE3) pLys, XL1 Blue, XL10 Golden, Rosetta-gami。
提供给客户:重组质粒的表达菌株及表达检测报告。
价格:免费
时间:1周
步骤4. 目标蛋白表达及纯化:

摇瓶培养1L重组细菌,诱导表达目标蛋白。
通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
利用蛋白酶去除不需要的纯化标签,再纯化获得所需的目标蛋白(可选,构建表达载体时需加入合适的蛋白酶切位点)。
通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
提供给客户:纯化好的目标蛋白1~5mg及纯化报告

   
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